HPLC法测定尼莫地平自微乳化软胶囊含量

【摘要】 　　
　　摘要:目的 建立尼莫地平自微乳化软胶囊含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法：色谱柱为diamonsil c18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为水甲醇乙腈(体积比25∶35∶40)，检测波长为237 nm， 柱温为40 ℃， 流速为1.0 ml/min。 结果 尼莫地平在10.16～81.28 μg/ml范围内线性关系良好，r=0.999 9，平均回收率为100.6%，rsd为0.71%。结论 建立的方法准确、重现性好，可作为尼莫地平自微乳化软胶囊的质量控制方法。

【关键词】 尼莫地平 自微乳化软胶囊 高效液相色谱法

abstract:objective to establish the hplc method for the determination of nimodipine in selfmicroemulsified soft capsules. methods the chromatographic condition was diamonsil c18 column (250 mm×4.6 mm,5 μm)， a mixture of watermethanolacetonitrile (25∶35∶40) as the mobile phase with a flow rate of 1.0 ml/min,and the detection wavelength was set at 237 nm at 40 ℃. results the linear range of nimodipine was 10.16～81.28 μg/ml,r=0.999 9. the average recovery of nimodipine was 100.57%,rsd=0.71%. conclusions the method was accurate and could be used in the determination of nimodipine in selfmicroemulsified soft capsules.

　　key words:selfmicroemulsified soft capsule; nimodipine; hplc

　　尼莫地平(nimodipine,nmp)是第二代二氢吡啶类钙离子阻滞剂，具有抗血管收缩和抗局部缺血作用，能明显改善脑血流量，临床上用于缺血性脑血管病、蛛网膜下腔出血引起的脑血管痉挛以及偏头疼、突发性耳聋，也可用于轻、中度高血压病等的治疗[1]。尼莫地平水溶性差，口服刺激性大，生物利用度低[2-3]，为此采用自微乳化技术将尼莫地平制成自微乳化软胶囊，以便提高其溶出度，进而提高其口服生物利用度。为了更好地控制本产品质量，保证产品的疗效，本文采用高效液相色谱法对制剂中尼莫地平的含量进行了测定，建立了分离效果好、简便可行的含量测定方法，可用于本制剂的质量控制。

　　1 仪器与试药

　　waters 高效液相色谱仪(waters 515泵，2487双波长紫外检测器，rheodyne 7725i进样阀)(美国waters公司);ckchrom色谱工作站(大连华洋科学仪器有限公司);fa2104电子天平(上海精密仪器科学有限公司);尼莫地平对照品(102700002，中国药品生物制品检定所);尼莫地平自微乳化软胶囊(自制)。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件

　　色谱柱：diamonsil c18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)(dikma);流动相：水甲醇乙腈(体积比25∶35∶40);检测波长：237 nm;柱温：40 ℃;流速：1.0 ml/min;进样量：20 μl。

　　2.2 溶液的配制

　　对照品贮备溶液的配制：取尼莫地平对照品约10 mg，精密称定，置50 ml量瓶中，加甲醇超声溶解，放冷后，稀释至刻度，作为贮备液。

　　供试品溶液的制备：精密称取本品内容物(约相当于尼莫地平10 mg)置250 ml量瓶中，加入150 ml甲醇，不断振摇后，加水稀释至刻度，摇匀，过滤，即得供试品溶液。

　　阴性对照溶液的制备：照处方比例自行制备不含尼莫地平的阴性对照样品，按供试品溶液制备方法制备。

　　2.3 系统适用性试验

　　取上述3种溶液按“2.1”色谱条件进样测定。结果本方法尼莫地平与样品中相邻色谱峰的分离度大于1.5，理论板数大于3 000，阴性对照在尼莫地平峰相应的保留时间处无干扰。见图1。

　　2.4 线性关系考察

　　精密量取对照品贮备液适量，用流动相分别稀释制成质量浓度为10.16、20.32、40.64、60.96、81.28 μg/ml的溶液，分别进样20 μl，以对照品峰面积(a)为纵坐标，以质量浓度(ρ)为横坐标，进行回归处理得回归方程为a=85581ρ-38260，r=0.999 9,表明尼莫地平质量浓度在10.16～81.28 μg/ml范围内与峰面积线性关系良好。

　　2.5 精密度试验

　　精密吸取上述对照品溶液(40.64 μg/ml)，按“2.1”项下色谱条件连续重复进样5次，测得尼莫地平的平均峰面积为3 437 841，rsd为0.45%，表明该方法的精密度良好。

　　2.6 重复性试验

　　取同一批号样品，按“2.2”项下方法制备供试品溶液6份，测得平均含量为102.4%，rsd为0.44%，表明方法重复性良好。

　　2.7 加样回收率试验

　　取已知含量软胶囊内容物约50 mg 6份，分别置250 ml量瓶中，精密称定，再分别加入尼莫地平对照液(10.16 mg/ml)各0.5 ml，加入150 ml甲醇，不断振摇后，加水稀释至刻度，摇匀，过滤，20 μl进样。结果见表1。表1 回收率试验结果

　　2.8 样品测定

　　分别精密称取3批不同批号的尼莫地平自微乳化软胶囊，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，按外标法以峰面积计算，结果批号070506、070509、070511的样品的相对标示含量分别101.9%、102.3%和101.7%。

　　3 讨 论

　　预试验中尝试用中国药典二部[4]中尼莫地平的含量测定方法，结果发现，阴性溶液干扰尼莫地平的测定。在此基础上对流动相进行极性调整，最终选定水甲醇乙腈(体积比25∶35∶40)为流动相(柱温为40 ℃，流速为1.0 ml/min)，分离效果良好，阴性溶液不干扰尼莫地平的测定。经紫外扫描，尼莫地平在237 nm波长处有最大吸收，故选237 nm为检测波长。以流动相为溶剂配制的溶液在24 h内稳定。本文对尼莫地平自微乳化软胶囊进行了含量测定，该方法简便、专属性强及重现性好，结果准确可靠，可用于该制剂的质量控制和分析。

【参考文献】
　　[1] 张振荣,张岩,刘新. 尼莫地平在脑血管病临床应用新进展[j]. 医学综述,2003,9(1):49-50.

　　[2] 逄秀娟,聂连之,段旭,等. 国产尼莫地平分散片的药代动力学和生物利用度[j]. 中国新药杂志,2001,10(2):108-109.

　　[3] 贺云霞,程刚,郝秀华,等. 尼莫地平大鼠在体肠吸收动力学[j]. 沈阳药科大学学报,2004,21(3):177-180.

　　[4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：二部[s].北京：化学工业出版社，2005:166.广东药学院学报