血红素提取论文

血红素提取论文

提取原理 血红蛋白在pH低于3.0时，血红素与珠蛋白的结合最为疏松，此时加入有机溶剂丙酮，使珠蛋白变性凝固，血红素则溶于丙酮中，在丙酮中加入适量的鞣酸或乙酸钠，可得到较纯的血红素结晶，然后用乙醇一乙醚洗涤，可得到精制血红素。血红素在波长385处有最大吸收，可直接进行比色测定。 试剂器材 1．试剂0．5%～1%柠檬酸三钠；生理盐水；95%乙醇；氯仿；0.15%亚硫酸氢钠；丙酮；0.1 mol/L NaOH；1 mol/L盐酸，血红素标准品。2．器材离心机；真空浓缩装置；真空干燥机；分光光度计；新鲜猪血。 操作步骤 1．血红素制备与纯化（1）新鲜猪血抗凝新鲜猪血，加入0.5%～1%柠檬酸三钠溶液（V/V=10：1），搅拌均匀，得新鲜抗凝猪血。 （2）分离红细胞取抗凝猪血10 mL于离心管中，以3 000 r/min离心15 min，倾出上清液（血浆），收集红细胞，用0.9%NaCl洗涤2次。洗涤方法为：用适量生理盐水悬浮红细胞，搅拌均匀，离心，收集红细胞沉淀，测定红细胞体积（mL）。（3）溶血加入相当于红细胞体积1倍的去离子水、0.25倍95%乙醇，搅拌30 min，红细胞吸水胀裂，血红蛋白释放出来。（4）分离血红蛋 白溶血后加人红细胞体积0.15倍的氯仿，搅拌15 min，离心，得到含血红蛋白的沉淀物。（5）分离血红素 上述沉淀物中加入相等于红细胞体积的0.15%亚硫酸氢钠溶液，使其溶解，然后加入红细胞体积4倍的丙酮，搅拌均匀，用0.1 mol/L盐酸溶液调节pH为3，使珠蛋白与血红素充分分离（抽提时间为10 min以上），然后4000 r/min离心10 min，弃沉淀，上清液即为血红素丙酮溶液。（6）血红素纯化 血红素丙酮溶液采用真空浓缩并回收丙酮，浓缩物用0.1 mol/L NaOH溶解，3 000 r/min离心10 min，收集上清液。用0.1 mol/L盐酸调pH至4～5，沉淀血红素，收集沉淀，用水洗沉淀至中性，50℃真空干燥至恒重，得血红素。测定血红素制品的重量（mg）。 2．血红素测定以0.1 mol/L NaOH分别溶解血红素标准品和提取得到的血红素制品，调整至适宜浓度，于385 nm处测定吸光度，计算样品中血红素提取率及纯度。

无机化学学术论文

无机化学是化学、材料、医药、化工、检验等许多专业必修的一门重要基础课程，下面我给大家分享无机化学学术论文，大家快来跟我一起欣赏吧。

生物无机化学研究进展

摘 要：本文主要叙述了生物无机化学的研究进展。主要从对含有微量元素的蛋白的突变、结构及性质的研究;酶的模拟;无机药物化学;金属元素中毒的研究等四个方面来介绍现在生物无机化学的进展。

关键词：生物无机化学;蛋白质;螯合剂;酶;无机药物化学

中图分类号：O62 文献标识码：A

文章编号：1009-0118(2012)07-0207-02

生物无机化学是无机化学和生物化学交叉的领域。它的任务是研究金属与生物配体之间的相互作用，它有赖于无机化学和生物化学两门学科水平的发展。由于研究方法的进展，使得揭示生命过程中的生物无机化学成为可能。生物无机化学主要分为两部分：一是研究生物体本身微量元素的作用，二是研究外界微量元素对机体的影响。

一、研究生物体本身微量元素的作用

(一)含有微量元素的蛋白的研究

含有微量元素的蛋白是生物无机化学中偏向生物领域的研究对象，做此项研究主要依靠生物化学技术。含有微量元素的蛋白是微量元素与蛋白质形成的配合物，与酶的区别在于含有微量元素的蛋白并不表现催化活性，但却有其他的重要功能。现在的研究在于发现新的蛋白，确定其结构、性质。

现在热门的蛋白有硒蛋白，因为硒蛋白是硒在体内存在和发挥生物功能的主要形式。硒的作用，主要在癌症、神经退行性疾病和病毒等方面，但结论不统一。现在主要在探索新的硒蛋白作为预防药物开发、癌症治疗和药物筛选靶标。如杜明等通过硫酸铵沉淀等方法,从富硒灵芝中获得了一种新的含硒蛋白,并研究了它的抗氧化活性与其硒含量间的关系。研究发现该蛋白的抗氧化活性与其硒含量具有相关性。

另外，也有对细胞色素进行研究。如官墨蓝等对细胞色素b5的突变体做了研究。为了深入了解细胞色素b5的64位氨基酸对血红素辅基微环境及蛋白性质的影响，对细胞色素b5第64位氨基酸残基进行保守性和非保守性突变。研究表明，细胞色素b5第64位氨基酸残基对稳定血红素辅基和维持蛋白的结构有重要的作用，在64位引入其他氨基酸残基使蛋白结构不太稳定。

(二)酶的模拟

酶的模拟就是从酶中挑选出起主导作用的因素来设计合成一些能表现生物功能的、比天然酶简单得多的非蛋白分子，通过研究它们来模拟酶的催化过程，找到控制生化过程的因素，从而得到更好的催化剂。

如硒酶的研究。通过对硒酶结构与功能的模拟,人们不仅可以了解硒酶结构与功能的关系,还可以进一步开发与硒酶相关的药物。对于硒酶的合成主要有三种方法，一是对硒酶进行化学模拟，二是对硒酶进行化学修饰，三是用基因工程方法生产含硒酶。对硒酶化学模拟主要集中在硒酶活性中心催化三联体Se-N的相互作用的模拟中。在这个方面主要有合成含有Se-N键的硒酶模拟物和在硒原子的附近引入氮原子，用分子内的螯合作用间接形成分子内螯合物，达到Se-N键的作用。对硒酶化学修饰主要方面有：1、将天然酶改造为含硒酶;2、设计含硒生物印迹酶;3、设计含硒抗体酶。硒蛋白模拟物在理解硒酶的生化作用中起着非常重要的作用。硒蛋白模拟物在抗氧化、抗癌及抗滤过性病原体等范围具有治疗潜能。

又如刘海洋等对核酸酶的化学模拟。核酸酶的化学模拟对于生物技术和分子生物学研究具有重要意义，Corrole是具有共轭电子结构的大环化合物，其结构上导致其配位化学行为易与金属形成配合物，其形成的配合物在许多反应中均有催化活性。该科研组研究了单羟基Corrole锰配合物对DNA的催化氧化断裂作用。结果表明,锰Corrole配合物可催化DNA的氧化断裂,而且断裂程度随着反应时间的增加而增加。宋玉民等研究了全反式维甲酸合钇配合物对DNA的切割和键合作用。实验表明，该配合物在生理条件下比配体和金属离子能更有效地切割质粒DNA。岳蕾等研究了铬配合物切割DNA的活性。研究表明，在H2O2存在条件下，Cr的配合物[Cr(bzimpy)2]+具有氧化切割DNA的活性，但被切割的DNA可被大肠杆菌修复。

对于固氮酶模拟的报道比较多。模拟固氮酶的目的主要是在温和的条件下将空气中的氮分子转化成有机化合物，从而加以利用。对固氮酶的活性中心模拟主要是钼铁硫原子簇，另外还有钼-硫醇等等的研究报道。

二、研究外界微量元素对机体的影响

(一)无机药物化学

无机药物的发展在生物无机领域中有很重要的地位。顺铂的抗肿瘤作用的发现开辟了无机药物化学的新领域。在抗癌药物应用中，顺铂药物目前仍在临床上使用，主要有四种铂配合物：顺铂、卡铂、顺糖氨铂、奥沙利铂。从1980年发现二烃基锡衍生物具有抗癌活性以来，人们先后合成了具有顺铂结构的二烃基二卤化锡配合物，与卡铂结构类似的有机锡化合物，以及有机锡羧酸衍生物等等。在锗化合物方面，从发现1971年合成的β-羧基乙基锗倍半氧化物具有抗癌活性以来，人们先后合成了许多有机的锗化合物。此外还有茂钛衍生物和稀土配合物。因为癌症是人类健康寿命最主要的杀手，所以在抗癌药物的研究开发方面将有很大的发展前景。除了合成新的药物外，在原有的药物基础上对原有的药物进行改良也是未来的科研方向，因为原有的药物具有较高的毒副作用，且抗癌范围较小。所以在无机抗癌药物这一方面，合成具有广谱高效抗癌活性且有较低的毒副作用和较长的持续时候的抗癌药物是主要发展方向;另外，对于无机金属药物的抗癌机理尚没有统一的理论，因此研究无机抗癌药物的作用机理也是主要研究方向。

无机药物在其他方面也有重要的应用。如金配合物在抗类风湿方面的应用，应用治疗类风湿关节炎有金Au的硫醇盐。在治疗胃病的过程中，铝盐也是主要依赖的药物，含铋的化合物是治疗胃溃疡的的主要药物。在无机药物的研究中，尚不清楚各种药物对机体疾病的治疗机理，所以研究无机药物的作用机理具有较大的前景。

放射照影药物的发展也是无机药物的发展方向。由于放射示踪、核磁共振在医学上的应用，使得各种造影剂的成为医生临床应用不可或缺的一个方面，如钡的造影剂。

(二)金属元素中毒的治疗

在外界的金属元素超过机体所需的浓度后，该元素就会对机体产生负面效应，引起疾病。元素的毒性主要因为它与机体基团的强配合性。对金属元素中毒的治疗主要是研究具有更强螯合能力的的螯合剂，使其跟有毒的金属离子结合形成更加稳定配合物，然后排出体外。理想的螯合剂须满足以下的条件：1、水溶性，且在生理的pH条件下有足够的螯合能力;2、分子大小和结构必须合适;3、必须专一迅速结合金属元素;4、很容易从体内排出;5、没有明显的毒性。如用EDTA来排出多余的离子，EDTA螯合性虽然很强，却选择性不强，在排出有害的金属离子的同时，同时也会损失一些有益的离子。如用去铁草胺B去除多余的铁，但是它不能去除血红素或运铁蛋白中的铁。现在的医用螯合物的研究方向主要是研究新的药剂，因为现在的螯合剂无论是在种类还是排出金属中毒的效率都不能满足医学的需要。

三、生物无机化学的发展趋势

生物无机化学以后的发展趋势是生命科学与技术进行有机紧密的融合。

对蛋白质分子进行研究，研究其具有生物功能的原理。人类的基因仅有几万个，而蛋白质却有十几万种，这说明生命的复杂性需要从蛋白质上去解释。而目前已知的蛋白和酶约有1/3需要金属离子作为辅助因子才能发挥作用，所以阐明这些生物大分子的结构和生物功能非常重要。对核酸的研究。研究金属元素对核酸的序列、构型、区域的选择性识别调控是生物无机化学的一个主要热点。如现在发现许多锌脂蛋白对DNA或RNA有调控作用。对这方面的研究将对以后的无机药物产生重要的影响。

既然21世纪生命科学会是研究热点之一，那么与生命科学紧密联系的生物无机化学也必将因此得到极大的发展，因此也将为人类作出更大的贡献。

参考文献：

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[3]何凤娇.无机化学[M].北京：科学出版社,2006.

[4]孙为银.配位化学[M].北京：化学工业出版社,2004.

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[6]刘海洋,刘兰英,张雷.锰(Ⅲ)Corrole配合物催化DNA氧化断裂[J].高等学校化学学报,2007,(9)：1628-1630.

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[10]聂晶,韩美娇,王科志.[Ru(phen)2dppz]2+二聚及对DNA键合性质的影响[J].高等学校化学学报,2007,(10)：1833-1835.

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人血红蛋白由珠蛋白和血红素结合而成，一个珠蛋白分子包括两条α链和两条非α链．每一条α链由141个氨基

（1）哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核和细胞器，因此提取的膜成分比较单一，只有细胞膜，因此常用哺乳动物的红细胞作为材料．
（2）第二类贫血mRNA上的相应位置上的密码子是UAU或UAC，DNA模板链上相关碱基序列是ATA或ATG，因此非模板链上的碱基组成TAT或TAC；第三类贫血病个体中，第63位氨基酸对应mRNA上的密码子是CGU或CGC，反密码子与密码子碱基互补配对，因此第63位氨基酸对应的反密码子的碱基组成为GCA或GCG．
（3）镰刀型贫血病携带者体内的红细胞有两面凹的圆饼状和镰刀状2种形态．
（4）分析表格中的信息可知，该实例说明基因通过控制蛋白质的结构直接控制生物的性状，基因还可以通过控制酶的合成调节细胞代谢间接控制生物的性状；由题意知，决定α链的两对基因位于一对同源染色体上，因此单对基因遵循基因分离定律，两对基因由于位于同一染色体上，不遵循自由组合定律．
（5）分析题图曲线可知，人的个体发育过程中构成血红蛋白的各条多肽链所占百分比存在差异，说明在个体发育的不同阶段编码血红蛋白各条多肽链的基因表达的具有选择性．
（6）甲是透析装置，用于除去分子量较小的杂质；乙图是凝胶色谱法分离和纯化蛋白质，分子量大的蛋白质下移的速率快；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，蛋白质迁移的取决于相对分子质量．
故答案为：
（1）哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核膜和细胞器膜的干扰
（2）TAT 或TAC      GCA或GCG 
（3）2
（4）基因通过控制酶的活性来控制生物的性状    单对基因遵循基因分离定律，两对基因由于位于同一染色体上，不遵循自由组合定律
（5）在个体发育的不同时期组成血红蛋白的多肽链存在差异    基因的表达具有选择性
（6）透析    大    相对分子质量

给猪打的血红素作用是什么？

猪血血红素是从猪血中提取出来的一种生物活性物质，血红素医学名称为卟啉，外文名称为Hemin; Chlorohemin ;Bovine 等。它的基本结构单位是卟啉环，相对分子质量为614.48。血红素系由蛋白质(Globin)和血基质(Heme)所组成，而铁是血基质的核心元素。[1]