wangmiao1211
m6A是真核生物中最丰富的内源性mRNA修饰,在肿瘤发生中起着重要作用,然而,其内在机制仍不十分清楚。来自中山大学口腔医院的研究团队在今年5月份在线发表了m6A修饰与口腔鳞状细胞癌(OSCC)相关研究成果[1]。研究者建立了雷帕霉素(rapamycin)诱导自噬的细胞模型来筛选m6A修饰酶,发现m6A去甲基化酶FTO通过靶向编码eIF4G1(真核细胞翻译起始因子γ1)的基因,在OSCC的自噬和肿瘤发生中起关键作用。敲除OSCC细胞系中FTO的表达,会导致eIF4G1的下调,同时增强自噬潮(或称自噬通量)和抑制肿瘤发生。雷帕霉素还会抑制FTO活性,直接靶向eIF4G1转录本,以m6A依赖方式介导其表达。双荧光素酶报告和突变实验证实,YTHDF2靶向eIF4G1。最后,在FTO沉默后,YTHDF2捕获含有m6A的eIF4G1转录本,导致mRNA降解和eIF4G1蛋白表达水平下降,从而促进自噬、减少肿瘤发生。因此,雷帕霉素可能通过调节m6A水平,决定OSCC的自噬潮,从而影响癌细胞的生物学特性。这一发现拓宽了我们对肿瘤发生过程中自噬和RNA甲基化之间的相互作用的理解,对于OSCC治疗策略的制定至关重要。meRIP-seq、m6A修饰定量、基因半衰期检测等这篇文章的主要研究思路整理如下图: 在研究伊始,OSCC发生发展是否涉及RNA修饰仍是一个问号,于是研究者首先对这个问题做了一个初步的鉴定: 1.比较OSCC和癌旁组织的整体m6A水平; 2.检测多种m6A修饰相关的蛋白的表达水平,包括METTL3、METTL14、WTAP、FTO和ALKBH5。研究者通过实验发现在自噬细胞模型中,FTO表达水平的减少最显著,于是以FTO为研究对象,通过沉默FTO以及自噬抑制剂处理,一系列实验验证(详见研究路线图),证明FTO对OSCC细胞的作用。研究至此,meRIP-seq登场了:通过对雷帕霉素诱导的自噬OSCC细胞进行 meRIP-seq 及生信分析,GO和KEGG的分析结果显示涉及自噬相关的基因(图2d),研究者取了自噬相关基因和m6A调控基因的交集,有30个(图2e)。30个基因之中,包括了已有研究表明能够抑制自噬的eIF4G1基因。于是接下来,就可以愉快地开展针对eIF4G1的基因功能研究了! 首先,可以进一步鉴定eIF4G1的m6A水平变化,这里可以采用 m6A-qPCR 技术,对特定的基因进行精确的m6A修饰水平定量。 然后,关于m6A修饰如何调控下游基因,有潜在的不同的机制,包括影响基因可变剪切、影响RNA稳定性、影响基因翻译效率等。本研究猜测m6A可能在自噬的过程中诱发了eIF4G1的降解。YFHDF2就是和衰减相关的m6A reader,研究者沉默了YTHDF2,检测eIF4G1的半衰期,发现降解效率减缓了,即 RNA的稳定性 发生了变化。 后续研究者还进行了很完整的体内外实验来研究FTO、YTHDF2是如何调控eIF4G1,影响OSCC细胞发展的(具体可看研究思路图)。这篇文章的研究思路很经典,包括刚接触m6A修饰课题的时候从何入手进行初筛,如何寻找m6A修饰相关蛋白,怎样挖掘m6A修饰调控的靶基因,可以从哪些方面进一步揭示m6A修饰背后的调控机制。 表观生物具有完备的RNA甲基化修饰研究技术服务,比如meRIP-seq、SELECT-m6A修饰定量技术服务与试剂盒(预售中)、ONT Direct RNA全长转录组测序、SLAM-seq以及Ribo-seq等产品,欢迎拨打电话咨询![1] Wang F, Liao Y, Zhang M, et al. N6-methyladenosine demethyltransferase FTO-mediated autophagy in malignant development of oral squamous cell carcinoma. Oncogene 2021 Jun;40(22). [2] Nombela P, Miguel-López B, Blanco S. The role of mA, mC and Ψ RNA modifications in cancer: Novel therapeutic opportunities. :Mol Cancer 2021 01 18;20(1).
雪诉离歌
A pplication of weighted gene co-expression network analysis to identify key modules and hub genes in oral squamous cell carcinoma tumorigenesis
关键词
口腔鳞状细胞癌
第一步 安装包
第二步 整理数据集和临床表型
第三步 绘制进化树
第四步 确定软阀值
第五步 构建共表达矩阵
第六步 TOM图
第七步 模块与形状的关系
第八步 感兴趣模块的具体基因分析
meimeimilly
四川大学口腔医院发表在《 CANCER IMMUNOLOGY IMMUNOTHERAPY 》期刊上题为 “OSCC cell‑secreted exosomal CMTM6 induced M2‑like macrophages polarization via ERK1/2 signaling pathway” 的文章涉及了一种新的体内转染方法:研究人员利用 体内转染试剂(EntransterTM-in vivo, Engreen) 将 siRNA 注射到小鼠体内,发现了口腔鳞状癌细胞的外泌体 CMTM6 通过 ERK1/2 信号通路诱导 M2 巨噬细胞极化,促进恶性进展。由此,靶向 CMTM6 结合 PD-L1 的抑制或免疫治疗或许是治疗口腔鳞状癌的新策略。
分子生物学(molecular biology) 在分子水平上研究生命现象的科学。研究生物大分子(核酸、蛋白质)的结 构、功能和生物合成等方面来阐明各种生命现
细胞凋亡与细胞坏死的区别及其生物学意义细胞凋亡是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主
1977年获上海市重大科技成果奖“中医扶正法治疗晚期支气管肺癌200例” 医学1979年获上海市高等教育局国庆三十周年献礼科技成果奖“中医辨证治疗晚期原发性肺癌
动物细胞工程是基于现代细胞生物学与实验技术发展起来的一门新兴学科,是理论与实践紧密结合的学科,在高等院校生命学科的课程设置中占有重要地位。下面是我为大家整理的动
台湾三大妇科癌症为子宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌,其中子宫颈癌已有疫苗可预防、子宫抹片的检测也相当广泛,而卵巢癌也有基因检测,可以切除提早预防,然而现今子宫内膜癌