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不同检测方法在检测手足口病中的应用

发布时间:2015-08-19 09:18

摘 要:目的:分析应用不同检测方法检测手足口病的临床效果。方法:选取手足口病确诊儿童132例,分离两份血清,一份测定cTnI含量,一份进行RT-PCR荧光分析,另对患儿进行CSF、WBC、hs-CRP及血糖联合进行检查,分析其各自效果。结果:cTnI检测阳性率为81.82%,荧光RT-PCR阳性率为97.73%,CSF、WBC、hs-CRP及血糖联合检查灵敏度为100%(P<0.05)。结论:荧光RT-PCR检测率高,CSF、WBC、hs-CRP及血糖联合检查的灵敏度高,两者均可作为确诊手足口病的临床依据。

关键词:手足口病;cTnI;荧光RT-PCR;联合检测
    手足口病是一种发生于3岁以下儿童的常见传染病。其主要致病原因为肠道病毒,危害极大,传染性强,严重者可以危害患儿生命健康。其并发症可以造成中枢神经系统疾病,造成患儿残疾或死亡,临床上手足口病的主要检查方法是血清cTnI含量测定、血清荧光RT-PCR及实验室各种检查联合确诊。研究主要探讨这三种措施对手足口病确诊的效果,现报告如下。

1 资料与方法

1.1  一般资料:选取2011年5月~2012年4月我院住院就诊手足口病确诊儿童132例,所有患儿符合相关诊断标准。男63例,女69例;年龄7个月~5岁,平均(2.3±0.5)岁;<3岁92例,≥3岁40例;体重7.2~22 kg,平均(15.3±2.3)kg;所有患儿入院后均经常规体温和体格检查,抽验血常规,X线胸片检查。

1.2  检测方法:小儿静脉采全血3~5 ml,放置于真空无菌采血管中。分离血清后,置—20℃冰箱冷存,一份血清用于含量测定,采用散射比混浊发分析,以cTnI>0.30 ng/ml为阳性,另一份行荧光RT-PCR分析,实时荧光定量PCR反应在DA7600 PCR仪上行PCR扩增,按说明书进行反应混合液配制和循环参数设置,置阳性梯度模板与阴性对照,结果根据说明书进行[1]

1.3  统计学处理:对文中所得数据进行统计学处理,采用SPSS 15.0软件进行分析,计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

不同方法检测手足口病的检测阳性率:见表1。可以得出荧光RT-PCR分析的阳性检测率高于cTnI的阳性检测率(P<0.05);但是进行脑脊液白细胞、外周血白细胞、血糖及超敏C-反应蛋白的检测率却不高,为了进一步求证其联合检查,将灵敏度(Se)、特异度(Sp)、准确度(Ac)、阳性预测值(+PV)、阴性预测值(-PV)作为评价标准,结果见表2。

表1  不同方法进行检测手足口病的结果

项目

cTnI

荧光RT-PCR

脑脊液白细胞

WBC

血糖

hs-CRP

阳性(例)

108

129

72

78

83

92

阴性(例)

24

4

60

54

49

40

阳性率(%)

81.82

97.73

54.55

59.09

62.88

69.70

表2  CSF、WBC、hs-CRP及血糖检测诊断手足口病的评价(%)

组合

联合检测

Se

Sp

Ac

+PV

-PV

CSF检查

87.88

96.97

93.94

94.70

90.15

WBC

63.34

93.18

83.33

87.88

75.76

hs-CRP

98.48

66.67

83.33

71.21

91.67

血糖

95.45

68.94

77.27

79.55

89.39

WBC-hs-CRP-血糖-CSF平行联合检查

100.00

45.32

81.23

67.20

97.10

WBC-hs-CRP-血糖-CSF系列联合检查

60.61

100.00

82.13

100.00

71.32

3 讨论

cTnI是一种存在于心肌细胞中的特殊蛋白质,心肌细胞受损后,cTnI进入血液,在心肌受损后4~6 h后,血液中cTnI浓度达到最大,并长时间高浓度存在与血液中,最长可达2周左右,因此,对于心肌受损的手足口病,cTnI的含量检测具有比较高的临床价值[2]。荧光PCR技术是近几年新兴起的一项检测项目,其封闭性良好,减少实验中样品污染的几率,在特异性、敏感性与速度上相比于常规RT-PCR技术均具有一定的优势,本次研究表明,荧光RT-PCR技术的阳性检测率为97.73%,相比于cTnI的检测率81.82%,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。单项检查中,脑脊液及白细胞检查灵敏度仅为87.88%、63.34%,临床上意义不大。在特异度上,超敏C-反应蛋白及血糖检测率太低。将四项联合起来,进行平行检测和系列检测,平行检测是灵敏度提高到100%,系列检测特异性及阳性值提高到100%,可以得出,联合检测有助于提高诊疗度。

综上所述,采用荧光RT-PCR技术或CSF、WBC、hs-CRP及血糖联合检查,是诊断手足口病的合理方法。临床值得应用。

4 参考文献

[1] 赵鲜丽.40例手足口病患儿的护理[J].中国实用医药,2008,35(3):158.

[2] 薛凤举.中国疾病预防与控制指南[M].北京:华夏出版社,2010:375.

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