食品添加剂中苯甲酸和山梨酸的检测与分析
我国对食品中苯甲酸和山梨酸的添加量有明确规定，但是个别不法商家为牟取利润，在食品产品中大量使用苯甲酸和山梨酸防腐[1]。为确保人民群众的生命健康，探索有效检测手段势在必行。
1 实验资料与方法
1.1 仪器与试剂
实验设备：紫外分光光度计（UV2300型，上海天美科技有限公司）；高效液相色谱仪（HPLC-2010型，日本岛津公司）；磁力搅拌加热器（C-MAG HS7型，德国IKA公司）；纯水机（Aquelix 5型，美国Millipore公司）。
实验试剂：苯甲酸钠（C6H5CO2Na）（汕头市西陇化工有限公司提供）；山梨酸钾（C6H7KO2）（国药集团化学试剂有限公司提供）；乙酸铵（CH3COONH4）、亚铁氰化钾[K4Fe（CN）6·3H2O]、乙酸锌[Zn（CH3COO）2]、磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O）、乙醚（C4H10O）、浓盐酸（HCl），均分析纯，可以直接投入实验，配制溶液；超纯水（纯水机制备）。
1.2 溶液制备
1.2.1 苯甲酸钠溶液[2]
制备5.0 g/L的苯甲酸钠溶液，取0.5 g苯甲酸钠，加水溶解后置入100 mL的容量瓶中定容，实验时根据需要稀释。
1.2.2 山梨酸钾溶液
山梨酸钾溶液按照4.0 g/L制备，取0.4 g山梨酸钾，加水溶解后置入100 mL的容量瓶中定容，實际实验时根据需要稀释[3]。
1.3 样品处理
1.3.1 液态食品样品处理[4]
饮料样品直接萃取，调色酒以及汽水样品首先排出二氧化碳（CO2），之后加入1∶1的盐酸（HCl）1 mL，进而酸化样品，并加入乙醚20 mL，反复萃取3次后合并乙醚，再加入5%的磷酸氢二钾溶液20 mL，反复萃取3次后放入锥形瓶，水浴蒸馏，将溶液加热到大约70 ℃，除去乙醚，转移至100 mL容量瓶中，定容至刻度线。
调色酒和饮料做加标实验时，取饮料3份，每份5 mL，分别加入不同剂量的苯甲酸钠标准溶液和山梨酸钾标准溶液中，添加后将溶液置入125 mL的分液漏斗中，排出二氧化碳，加入1∶1的盐酸1 mL，对样品酸化，并加入乙醚20 mL，反复萃取3次后合并乙醚相，再加入5%的磷酸氢二钾溶液20 mL，反复萃取3次后置入锥形瓶，水浴蒸馏，将溶液加热到大约70 ℃，除去乙醚，转移至100 mL容量瓶中，定容至刻度线。
1.3.2 固态食品样品处理[5]
固体类食品样品首先溶解、离心，之后萃取、定容，获取待测试液之后开始加标实验。①将山楂片、蜜饯和花生酥等食品样品粉碎均匀，之后取2～3 g粉碎样品，放入50 mL的烧杯中，并向烧杯中加入超纯水，再超声加热提取，持续10 min，之后将样品置入50 mL的离心管中，以4 000 r/min离心处理8 min，离心完成后吸出上层清液，将样品装入125 mL的分液漏斗，之后加入1∶1的盐酸1 mL，对样品酸化，并加入乙醚20 mL，反复萃取3次后合并乙醚相，再加入5%的磷酸氢二钾溶液20 mL，反复萃取3次后置入锥形瓶，水浴蒸馏，将溶液加热到大约70 ℃，除去乙醚，转移至100 mL容量瓶，定容至刻度。
1.4 实验原理[6]
本次实验中，采用高效液相色谱比照实验，样品处理参照GB/T 23495-2009方法，色谱采用YWG-C18不锈钢柱，流动相采用甲醇-乙酸铵溶液，流速为1 mL/min，进样标准为10 μL，紫外检测波长为230 nm，按照保留时间定性，定量按照外标峰面积。
1.5 实验方法
1.5.1 绘制工作曲线
按照逐级稀释的方法，将配制好的苯甲酸钠标准贮存液、山梨酸钾标准贮存液稀释成不同浓度，采用紫外线分光光度计，在200～350 nm的波长内，依次检测不同浓度样品中苯甲酸钠、山梨酸钾的含量，用水做空白实验，在224、252 nm波长下记录不同浓度样品中苯甲酸钠、山梨酸钾的吸光度，进而绘制工作曲线。
1.5.2 防腐剂预报模型
采用正交设计，配制不同浓度的苯甲酸钠、山梨酸钾混合溶液，共25份，用紫外线分光光度计在特定波长下检测吸光谱，并采用偏最小二乘变量筛选法处理矩阵数据，从而建立预报模型。
1.5.3 混合样品检测
随机配制不同浓度的苯甲酸钠、山梨酸钾混合溶液12份，每份10 mL，在选定波长下检测吸光谱，用水做空白实验，进而分析预报模型检测的准确性。
随机选取苯甲酸钠、山梨酸钾混合溶液1份，重复检测11次，用水做空白实验，之后采用防腐剂预报模型处理检测结果，进而观察预报模型检测的精密度。
2 结果分析
2.1 工作曲线
苯甲酸钠和山梨酸钾对紫外光的吸收性强，因此在200～350 nm波长下扫描样品，得出的吸光谱如图1所示。
2.2 液体食品检测结果分析
对比该方法测量液体食品的结果与国际上通用方法的检测结果，苯甲酸钠检测结果的平均偏差为2.9%，山梨酸钾检测结果的平均偏差为4.7%，苯甲酸钠和山梨酸钾检测结果的平均偏差均小于规定标准5.0%，证明该检测方法检测食品中苯甲酸钠和山梨酸钾含量的准确性良好。
此外，对样品重复检测11次，苯甲酸钠检测结果的标准偏差为0.4%，山梨酸钾检测结果的标准偏差为2.2%，均在规定标准之内，说明证明该检测方法检测食品中苯甲酸钠和山梨酸钾含量的经精密度较高。
2.3 固体食品检测结果分析
对照该方法检测固体食品的结果与国际上通用方法的检测结果，两种方法检测结果相符合，证明该检测方法检测食品中苯甲酸钠和山梨酸钾含量准确可靠，具体结果如表1所示。
3 结语
檢测苯甲酸和山梨酸含量是保证食品安全的常见途径，目前检测方法主要有离子色谱法、紫外线光度法、液相色谱法和气相色谱法等，世界上对食品中苯甲酸和山梨酸含量尚且没有形成统一标准。一些发达国家已经明确规定，食品中不能添加苯甲酸，我国对食品中苯甲酸和山梨酸的添加含量也具有明确规定，本文介绍相关检测方法，证实该方法具有良好的准确性，以后发展中如何进一步提高食品安全检测的水平和质量，还有待于人们继续研究。
参考文献：
[1]魏文华，徐 辉.荆州市四类食品中苯甲酸和山梨酸含量的检测与分析[J].公共卫生与预防医学，2010（1）：100.
[2]田 月，张陆兵，曹丽华.46批次酱腌菜中苯甲酸、山梨酸含量检测分析[J].化学工程与装备，2010（4）：134-135.
[3]丁淑珍，郭 勇.色谱法检测乳酸菌饮料中苯甲酸山梨酸含量的探讨[J].科技促进发展（应用版），2011（4）：280.
[4]周桂友，侯艳芳，赵 芳，等.果汁中苯甲酸山梨酸含量的不确定度评定[J].广州化工，2011（23）：109-111，124.
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[6]李慧敏.HPLC法检测口服液类保健食品中苯甲酸和山梨酸的含量[J].中国药事，2013（1）：38-40.